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細胞培養操作過程要使用超凈工作臺
發布時間:2012-06-11 06:05:39   瀏覽:8417

細胞培養操作過程要使用超凈工作臺

目的:建立一套適用的培養操作規程,進行無污染條件下體外細胞擴大培養。

主體內容:
操作步驟:
1、紫外燈照射超凈工作臺30分鐘(根據實際情況,可適當延長或縮短照射時間,但時間長一點總比時間短一點安全。)


2、將培養液、PBS、胰酶放在37℃水浴中溫育(每次用多少,溫育多少,這樣既可節約溫育的時間,又可延長藥品的使用期限。)


3、超凈工作臺照射30分鐘后,關閉紫外,打開照明,打開排風10分鐘后再次進入細胞培養室。(注意:要打開排風10分鐘后再進行操作,這樣才能保證循環的風是無菌的。同時還會避免有菌的風直接吹到人的呼吸道中,對人體也有一定的保護作用)


4、戴上口罩及手套(有條件的最好戴上帽子,不過也沒關系,我們實驗室就沒戴)


5、用70-75%的酒精擦試實驗物品,然后拿入超凈工作臺中。


6、操作時注意以下幾點:盡量在酒精燈火焰附近操作,但如果管子里有細胞就要離火焰有一定距離了,否則細胞要燙死了;不要重復使用移液管(即吸一次后,就換新的管);不要在敞開的容器上方操作;手上的酒精不要擦太多,否則靠近酒精燈時容易把手燒到(我想很多人都有過被燒的經歷吧);


其實操作是很簡單的,但一定要仔細。尤其是第2步許多人都不注意,細胞平時放在37℃培養,如果加入的PBS或胰酶溫度太低,會對細胞有操傷的,雖然這種損傷短期內察覺不到,但時間長了,就會顯現出來。

來源:http://www.airsolutionsasia.com/   蘇布會-13570963006

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